Gill蘇木素染色液(Gill No.1)試驗(yàn)步驟

產(chǎn)品名稱：Gill蘇木素染色液(Gill No.1)
規(guī)格：100ml 500ml
分類：HE染色
儲(chǔ)存條件：避光，24個(gè)月
用途：進(jìn)行性染色液,尤其適用于細(xì)胞學(xué)涂片染色
注意事項(xiàng)：Gill No.1蘇木素染色液又稱GillⅠ液,為正常濃度,同SIGMA Hematoxylin Solution, Gill No.1 染色時(shí)間3分鐘。屬于半氧化蘇木素,比Harris蘇木素穩(wěn)定,染色后無需鹽酸乙醇分化,其缺點(diǎn)是：黏附的明膠甚至玻片也會(huì)染色。


簡介：蘇木素(Hematoxylin)和伊紅(Eosin)聯(lián)合染色簡稱HE染色，是病理學(xué)和組織學(xué)最常用的一種染色方法。蘇木精為堿性天然染料，可使細(xì)胞核著色。細(xì)胞核內(nèi)染色質(zhì)的主要成分是DNA，在DNA的雙螺旋結(jié)構(gòu)中，兩條核苷酸鏈上的磷酸基向外，使DNA雙螺旋的外側(cè)帶負(fù)電荷，呈酸性，很容易與帶正電荷的蘇木精堿性染料以離子鍵或氫鍵結(jié)合而被染色。

Gill蘇木素染色液(GillNo.1)又稱GillⅠ液，屬半氧化蘇木素染色液，蘇木精含量小，屬于正常濃度，屬進(jìn)行性染色，故染色后不需鹽酸乙醇分化。特別適用于細(xì)胞學(xué)涂片染色，染色約3～5min。該染色液的缺點(diǎn)是黏附的明膠甚至玻片本身都會(huì)著色。不推薦用于石蠟切片染色，石蠟切片染色時(shí)間應(yīng)大于15min，較少用于臨床診斷的制片染色。

染色原理：
1、細(xì)胞核染色的原理：蘇木素為堿性天然染料，可使細(xì)胞核著色。細(xì)胞核內(nèi)染色質(zhì)的成分主要是DNA，在DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)中，兩條核苷酸鏈上的磷酸基向外，使DNA雙螺旋的外側(cè)帶負(fù)電荷，呈酸性，很容易與帶正電荷的蘇木素堿性染料以離子鍵或氫鍵結(jié)合而被染色。蘇木素在堿性溶液中呈藍(lán)色，所以細(xì)胞核被染成藍(lán)色。

2、細(xì)胞漿染色的原理：伊紅是一種化學(xué)合成的酸性染料，在一定條件下可使細(xì)胞漿著色。細(xì)胞漿的主要成分是蛋白質(zhì)，為兩性化合物，細(xì)胞漿的染色與染液的pH值密切相關(guān)。當(dāng)染色液pH值在胞漿蛋白質(zhì)等電點(diǎn)(4.7～5.0)以下時(shí)，胞漿蛋白質(zhì)以堿式電離，則細(xì)胞漿帶正電荷，就可被帶負(fù)電荷的酸性染料染色。伊紅在水中離解成帶負(fù)電荷的陰離子，與胞漿蛋白質(zhì)帶正電荷的陽離子結(jié)合，使細(xì)胞漿著色，呈現(xiàn)紅色。

3、分化作用：染色后，用某些特定的溶液將組織過多結(jié)合的染色劑脫去，這個(gè)過程稱為分化作用，所用的溶液稱為分化液。在HE染色中常用1%鹽酸乙醇作為分化液，因酸能破壞蘇木素的醌型結(jié)構(gòu)，使組織與色素分離而退色。大多數(shù)組織經(jīng)蘇木素染色后，必須用1%鹽酸乙醇分化，使細(xì)胞核過多結(jié)合的蘇木素染料和細(xì)胞漿吸附的蘇木素染料脫去，再進(jìn)行伊紅染色，才能保證細(xì)胞核與細(xì)胞漿染色的分明。

4、返藍(lán)作用：分化之后，蘇木素在酸性條件下處于紅色離子狀態(tài)，呈紅色；在堿性條件下處于藍(lán)色離子狀態(tài)，呈藍(lán)色。組織切片經(jīng)酸性乙醇分化后呈紅色或粉紅色，立即用水除去組織切片上的酸而中止分化，再用弱堿性水使蘇木素染上的細(xì)胞核呈現(xiàn)藍(lán)色，這個(gè)過程稱為返藍(lán)作用或藍(lán)化作用。另外用自來水浸洗也可使細(xì)胞核返藍(lán)，但所需時(shí)間較長。

自備材料：
1、鹽酸乙醇分化液
2、藍(lán)化液，如稀氨水、碳酸鋰溶液等
3、系列乙醇

操作步驟(僅供參考)：
1、根據(jù)實(shí)驗(yàn)具體需求操作。
2、細(xì)胞涂片染色時(shí)間一般3~5min，無需鹽酸乙醇分化。

注意事項(xiàng)：
1. 切片脫蠟應(yīng)盡量干凈。系列乙醇應(yīng)經(jīng)常更換新液。
2. 冷凍切片染色時(shí)間盡量要短。
3. 藍(lán)化液常使用 0.2～1%氨水或Scott 促藍(lán)液或 0.1～1%碳酸鋰溶液。
4. 為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
有效期： 12 個(gè)月有效。