Gill蘇木素染色液(Gill No.1)試驗步驟

產(chǎn)品名稱：Gill蘇木素染色液(Gill No.1)
規(guī)格：100ml 500ml
分類：HE染色
儲存條件：避光，24個月
用途：進行性染色液,尤其適用于細胞學涂片染色
注意事項：Gill No.1蘇木素染色液又稱GillⅠ液,為正常濃度,同SIGMA Hematoxylin Solution, Gill No.1 染色時間3分鐘。屬于半氧化蘇木素,比Harris蘇木素穩(wěn)定,染色后無需鹽酸乙醇分化,其缺點是：黏附的明膠甚至玻片也會染色。


簡介：蘇木素(Hematoxylin)和伊紅(Eosin)聯(lián)合染色簡稱HE染色，是病理學和組織學最常用的一種染色方法。蘇木精為堿性天然染料，可使細胞核著色。細胞核內(nèi)染色質(zhì)的主要成分是DNA，在DNA的雙螺旋結(jié)構(gòu)中，兩條核苷酸鏈上的磷酸基向外，使DNA雙螺旋的外側(cè)帶負電荷，呈酸性，很容易與帶正電荷的蘇木精堿性染料以離子鍵或氫鍵結(jié)合而被染色。

Gill蘇木素染色液(GillNo.1)又稱GillⅠ液，屬半氧化蘇木素染色液，蘇木精含量小，屬于正常濃度，屬進行性染色，故染色后不需鹽酸乙醇分化。特別適用于細胞學涂片染色，染色約3～5min。該染色液的缺點是黏附的明膠甚至玻片本身都會著色。不推薦用于石蠟切片染色，石蠟切片染色時間應大于15min，較少用于臨床診斷的制片染色。

染色原理：
1、細胞核染色的原理：蘇木素為堿性天然染料，可使細胞核著色。細胞核內(nèi)染色質(zhì)的成分主要是DNA，在DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)中，兩條核苷酸鏈上的磷酸基向外，使DNA雙螺旋的外側(cè)帶負電荷，呈酸性，很容易與帶正電荷的蘇木素堿性染料以離子鍵或氫鍵結(jié)合而被染色。蘇木素在堿性溶液中呈藍色，所以細胞核被染成藍色。

2、細胞漿染色的原理：伊紅是一種化學合成的酸性染料，在一定條件下可使細胞漿著色。細胞漿的主要成分是蛋白質(zhì)，為兩性化合物，細胞漿的染色與染液的pH值密切相關。當染色液pH值在胞漿蛋白質(zhì)等電點(4.7～5.0)以下時，胞漿蛋白質(zhì)以堿式電離，則細胞漿帶正電荷，就可被帶負電荷的酸性染料染色。伊紅在水中離解成帶負電荷的陰離子，與胞漿蛋白質(zhì)帶正電荷的陽離子結(jié)合，使細胞漿著色，呈現(xiàn)紅色。

3、分化作用：染色后，用某些特定的溶液將組織過多結(jié)合的染色劑脫去，這個過程稱為分化作用，所用的溶液稱為分化液。在HE染色中常用1%鹽酸乙醇作為分化液，因酸能破壞蘇木素的醌型結(jié)構(gòu)，使組織與色素分離而退色。大多數(shù)組織經(jīng)蘇木素染色后，必須用1%鹽酸乙醇分化，使細胞核過多結(jié)合的蘇木素染料和細胞漿吸附的蘇木素染料脫去，再進行伊紅染色，才能保證細胞核與細胞漿染色的分明。

4、返藍作用：分化之后，蘇木素在酸性條件下處于紅色離子狀態(tài)，呈紅色；在堿性條件下處于藍色離子狀態(tài)，呈藍色。組織切片經(jīng)酸性乙醇分化后呈紅色或粉紅色，立即用水除去組織切片上的酸而中止分化，再用弱堿性水使蘇木素染上的細胞核呈現(xiàn)藍色，這個過程稱為返藍作用或藍化作用。另外用自來水浸洗也可使細胞核返藍，但所需時間較長。

自備材料：
1、鹽酸乙醇分化液
2、藍化液，如稀氨水、碳酸鋰溶液等
3、系列乙醇

操作步驟(僅供參考)：
1、根據(jù)實驗具體需求操作。
2、細胞涂片染色時間一般3~5min，無需鹽酸乙醇分化。

注意事項：
1. 切片脫蠟應盡量干凈。系列乙醇應經(jīng)常更換新液。
2. 冷凍切片染色時間盡量要短。
3. 藍化液常使用 0.2～1%氨水或Scott 促藍液或 0.1～1%碳酸鋰溶液。
4. 為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。
有效期： 12 個月有效。