Dacie氏液實驗方法
2021-07-16 14:51 來源:上海遠慕生物試劑
產品名稱:Dacie氏液
規(guī)格:100ml
產品分類:細胞染色
保存條件:室溫,12個月
用途:用于紅細胞計數(shù)
注意事項:由檸檬酸鈉,甲醛等組成。
產品說明:紅細胞(redbloodcell,RBC),是血液中數(shù)量最多的一種血細胞。Dacie氏液的作用原理是用等滲稀釋液將血液按一定的倍數(shù)稀釋,充入計數(shù)池后顯微鏡下計數(shù)一定體積內紅細胞數(shù),換算求出每升血液中紅細胞的數(shù)量。該紅細胞稀釋液僅用于科研領域,不用于臨床診斷。
自備材料:新鮮全血、微量吸管、細胞計數(shù)板、顯微鏡
操作說明(僅供參考):
1.取小號試管,加Dacie氏液4.0ml。
2.用清潔干燥微量吸管取末梢血或抗凝血20μl,擦去管外余血后加至Dacie氏液底部,輕輕將血放出,再輕吸上層清液清洗吸管2~3次,立即混勻。
3.混勻后,用干凈微量吸管將紅細胞懸液充入計數(shù)池,棄去前四滴,不得有空泡或外溢,充池后靜置1-2min后計數(shù)。
4.高倍鏡下依次計數(shù)中央大方格內四角和正中5個中方格內的紅細胞。壓線細胞按“數(shù)上不數(shù)下,數(shù)左不數(shù)右”的原則進行計數(shù)。
5.計算:紅細胞數(shù)/L=5個中方格內紅細胞數(shù)×5×10×200×106
=5個中方格內紅細胞數(shù)×1010
=5個中方格內紅細胞數(shù)/100×10
式中:
×5 5個中方格換算成1個大方格
×10 1個大方格容積為0.1ul,換算成1.0ul
×200 血液的實際稀釋倍數(shù)應為201倍,按200倍便于計算
×106 由1ul換算成1L
注意事項:
1.采血時不能過于擠壓,針刺深度應適當。
2.小試管、計數(shù)板均應清潔,以免雜質、微粒等被誤認為紅細胞。
3.在參考范圍數(shù)值內,兩次紅細胞計數(shù)相差不得超過5%。
4.不允許以血紅蛋白濃度來折算紅細胞數(shù)。
5.為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。