植物過(guò)氧化物酶(POD)提取試劑產(chǎn)品簡(jiǎn)介

中文名稱:植物過(guò)氧化物酶(POD)提取試劑
儲(chǔ)存條件：4℃，12個(gè)月
產(chǎn)品規(guī)格：500ml
產(chǎn)品用途：植物過(guò)氧化物酶(POD)提取液主要用于裂解植物組織，提取植物樣品中的過(guò)氧化物酶。該試劑僅用于科研領(lǐng)域，不宜用于臨床診斷或其他用途
 
產(chǎn)品簡(jiǎn)介：過(guò)氧化物酶(peroxisome，POD)是以過(guò)氧化氫為電子受體催化底物氧化的酶，主要存在于細(xì)胞的過(guò)氧化物酶體中，以鐵卟啉為輔基，可催化過(guò)氧化氫，氧化酚類和胺類化合物，具有消除過(guò)氧化氫和酚類、胺類毒性的雙重作用。該酶屬于細(xì)胞木質(zhì)素合成途徑中間的關(guān)鍵酶，研究該酶可以探討多種生物細(xì)胞發(fā)育過(guò)程中木質(zhì)素沉積的代謝機(jī)理，為減少水果石細(xì)胞含量提高其品質(zhì)提供依據(jù)。
 
試劑：
(1)0.1%愈創(chuàng)木酚
(2)0.18% H2O2:取30%H2O2 3ml，蒸餾水定量至500ml
(3)標(biāo)準(zhǔn)母液：吸取 5% K2Cr2O7 1.2ml和純化的10%Co（NO3）2 溶液50ml，混合后加蒸餾水稀釋7倍，即為每毫升相當(dāng)于6.75靏四鄰甲氧基苯酚標(biāo)準(zhǔn)母液
 
方法步驟：
（1）標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作：取20ml具塞試管6支，編號(hào)，按下表配制四鄰甲氧基苯酚標(biāo)準(zhǔn)系列溶液，混勻后以1號(hào)管調(diào)零，于470 nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度，以標(biāo)準(zhǔn)液濃度為橫坐標(biāo)，吸光度為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線?；蛴糜?jì)算器求出吸光度（Y）隨標(biāo)準(zhǔn)液濃度（X）變化的線性回歸方程。
2）POD的提?。喝〈郎y(cè)植物樣品（如葉片等），剪碎混勻，稱取0.5?1.0 g于研缽中，加少量 石英砂、CaC03和適量蒸餾水，冰浴研磨勻漿，蒸餾水定最至50 mL，搖勻后離心，上清液即為待測(cè)酶液。
 
（3）POD活性測(cè)定：取20mL具塞試管6支，3支測(cè)定（3個(gè)重復(fù)），3支空白對(duì)照。各加入酶液1.0 mL,0.1%愈創(chuàng)木酚1.0 mL，蒸餾水6.9 mL，搖勻，加入0.18% H202 1.0 mL(空白管不加，多加1.0mL蒸餾水），搖勻（計(jì)時(shí)），25℃下準(zhǔn)確反應(yīng)10 min,加5%偏磷酸0.2 mL終止反應(yīng)。用標(biāo)準(zhǔn)曲線1號(hào)管調(diào)零，于分光光度計(jì)上測(cè)定3支測(cè)定管和空白對(duì)照管的A470。
 
計(jì)算公式
 
    式中，X為測(cè)定管四鄰甲氧基苯酚的含量（mg)；X0為對(duì)照四鄰甲氧基苯酚的含量（靏)；Vt為酶液總體積(mL);FW為樣品鮮重（g)；Vs為測(cè)定時(shí)取酶液的量（mL)；t為酶作用的時(shí)間（min)。