合成培養(yǎng)基配制實(shí)驗(yàn)

實(shí)驗(yàn)方法原理：

干粉型培養(yǎng)基是用球磨機(jī)或噴霧法將各種培養(yǎng)液成分混合后制成，具有性質(zhì)穩(wěn)定、便于貯存和運(yùn)輸、使用方法簡便等優(yōu)點(diǎn)。具有維持細(xì)胞生存和代謝需要的效果，與傳統(tǒng)方式制備的合成培養(yǎng)基一樣好。

干粉培養(yǎng)基因顆粒極細(xì)，很容易完全溶解于水，配制培養(yǎng)液方法極易掌握，只要按照說明書將規(guī)定重量的干粉溶解在一定量的水中即可；或按比例配制，經(jīng)過消毒滅菌后即使用。

實(shí)驗(yàn)材料： 干粉

試劑、試劑盒：蒸餾水 NaHCO3 HCl NaOH

儀器、耗材：濾膜

實(shí)驗(yàn)步驟：

 用干粉制備培養(yǎng)液的過程如下

1.  制備出去離子水（玻璃三蒸餾水）；

2.  加溫水至15—30 ℃；

3.  把干粉加入水中，攪拌令之溶解；

4.  加NaHCO3；

5.  加水至最終量；

6.  必要時(shí)用1N HCl 或1N NaOH 調(diào)節(jié)pH；因?yàn)V過的pH 可能受影響；

7.  用0.22 μm 或小于此微孔濾膜濾過消毒。

注意事項(xiàng)：

1.  不同廠家生產(chǎn)的同種產(chǎn)品其成分比例可能不全相同，配制方法也不同。

2.  有的培養(yǎng)基需加熱或通氣來幫助溶解，此外還應(yīng)注意有的培養(yǎng)基成分不完全，要求另外加入補(bǔ)充成分。

3.  如谷氨酰胺就是時(shí)常再單獨(dú)加入的成分。另外一般都不含NaHCO3 成分，也需配制時(shí)自行加入。

4.  但總的原則是配制過程中要使每一種成分都必須充分溶解和避免出現(xiàn)沉淀。

5.  所以在配制培養(yǎng)液時(shí)，要按照各種成分的性質(zhì)、分成若干組分個(gè)別溶解，最后按比例和一定順序混合。

6.  掌握1—2 種粉劑的配法即可，其它大同小異。