一、 石蠟切片
1. 取材: 刀片要求鋒利而薄,組織厚度約2—3mm, 大小1.5×1.5×0.2~0.3cm為宜. 取材時間越快越好.
2. 固定: 組織取下后應立即放入10%福爾馬林(相當于4%甲醛)固定.
注意:
(1). 固定液量應為組織塊體積的40倍.
(2) 固定時間固定時間與使用的固定液種類和組織塊大小, 溫度等有關. 一般為3—24h.二、 HE染色
1. 染色前切片處理2. 染色步驟
二 甲苯脫蠟(10’)→ 無水乙醇洗去二甲苯(1’×2次)→95%酒精(1’)→90%酒精(1’)→85%酒精(1’)→自來水洗(2’)→蘇木精染色(1—5’)→自來水洗 (1’)→1%鹽酸酒精分化20s→自來水洗(1’)→稀氨水(1%)反藍30s→自來水或蒸餾水洗(1’)→伊紅染色(20s—5min)→自來水洗 (30s)→85%酒精脫水(20s)→90%酒精脫水(30s)→95%酒精(1’)→95%酒精(1’)→100%酒精(2’)→100%酒精 (2’)→二甲苯(2’)→中性樹膠封片.
3. 染色結果: 細胞核呈蘭色, 胞漿呈紅色.
三、 鹽酸酒精的配制
濃鹽酸0.5—1ml + 75%酒精99ml.
此液用一段時間后需延長或更換液體, 新液體分化時間要短.