1、采集樣品前的準(zhǔn)備事項(xiàng)
A、器具
a、器具的準(zhǔn)備
保溫箱或保溫瓶,酒精棉,碘酒棉,棉簽、注射器及針頭(7×38,9×38,12×38,20×38等)。
b、輔助器材的準(zhǔn)備
保溫箱、離心管、試管架、記號(hào)筆、自封袋,膠布、封口膜、封條、冰(暖)袋等。
B、防護(hù)安全用品
在給新生牛血清采集時(shí),我們會(huì)要求采集者都應(yīng)該注意防護(hù)安全,需要準(zhǔn)備好口罩、乳膠手套、防護(hù)服、防護(hù)帽、膠靴等。
2、采集樣品進(jìn)行時(shí)
A、操作步驟
a、由于新生牛屬比較小型體,所以我們只需將其穩(wěn)定,使其頭部稍前伸并稍偏向?qū)?cè)。
b、對(duì)頸靜脈局部進(jìn)行剪毛、消毒,在這過(guò)程中,我們最好要安撫新生牛的情緒,以免新生牛出現(xiàn)不適而亂動(dòng)。
c、看清頸靜脈后,采血者用左手拇指(或食指與中指)在采血部位稍下方(近心端)壓迫靜脈血管,使之充盈、怒張。
d、右手持采血針頭,沿頸靜脈溝與皮膚呈45°角,迅速刺入皮膚及血管內(nèi),如見(jiàn)回血,即證明已刺入;使針頭后端靠血管內(nèi),如見(jiàn)回血,即證明已刺入;使針頭后端靠近皮膚,以減小其間的角度,近似平行地將針頭再伸入血管內(nèi)1~2厘米。
e、放開(kāi)壓迫脈管的左手,收集血液。采完后,以干棉球壓迫局部并拔出針頭,再以5%碘酊進(jìn)行局部消毒。
B、注意事項(xiàng)
a、采血完畢,做好止血工作,即用干棉球壓迫采血部位止血,防止血流過(guò)多。
b、牛的皮膚較厚,頸靜脈采血刺入時(shí)應(yīng)用力并瞬時(shí)刺入,見(jiàn)有血液流出后,將針頭送入采血管中,即可流出血液。
3、采集樣品成功后的保存及編號(hào)填寫(xiě)
a、待樣品采集完畢后,我們應(yīng)該要對(duì)其進(jìn)行血樣編號(hào)填寫(xiě)及保存,血樣采集后應(yīng)立即進(jìn)行編號(hào),編號(hào)注意與被采畜禽一一對(duì)應(yīng)。
b、編號(hào)規(guī)則:注明采集地區(qū)、養(yǎng)殖場(chǎng)名稱(chēng)、動(dòng)物種類(lèi)(如采樣較多,可以一個(gè)養(yǎng)殖場(chǎng)一個(gè)自封袋,在自封袋上注明信息,在離心管上注明編號(hào))。
c、保存方法:一般選用塑料泡沫箱存放血液或血清。采血后針頭向上扎進(jìn)箱壁或放入離心管中存放;箱內(nèi)放入冰塊或暖水袋,保證箱內(nèi)20-25℃的室溫水平保存2小時(shí)以上即可析出血清;如果能在24小時(shí)內(nèi)及時(shí)送樣可2-8℃冷藏保存,若不能及時(shí)送樣化驗(yàn)需冷凍保存。
1、在說(shuō)到新生牛血清的應(yīng)用范圍前,我們需要先了解一下培養(yǎng)基與新生牛之間的關(guān)系,細(xì)胞培養(yǎng)基是培養(yǎng)環(huán)境中最重要的成分,由培養(yǎng)基和新生牛血清混合組成的完全培養(yǎng)基能夠提供細(xì)胞生長(zhǎng)所必需的營(yíng)養(yǎng)素、生長(zhǎng)因子和激素,并能調(diào)節(jié)培養(yǎng)體系的 pH 值和滲透壓。
2、目前主要有兩種基本的細(xì)胞培養(yǎng)體系,一種是使細(xì)胞在人工基質(zhì)上單層生長(zhǎng) ,即貼壁培養(yǎng)、微載體、片狀載體等培養(yǎng)方式),另一種是使細(xì)胞在培養(yǎng)基中自由漂浮生長(zhǎng) 即懸浮培養(yǎng),其中包括全懸浮培養(yǎng)和需要借助載體的培養(yǎng)。
3、除造血細(xì)胞系和其他一些細(xì)胞外,大多數(shù)脊椎動(dòng)物細(xì)胞均具有貼壁依賴(lài)性,必須在合適的基質(zhì)上培養(yǎng),且該基質(zhì)必須經(jīng)過(guò)特殊處理,以便細(xì)胞粘附和伸展 (即組織培養(yǎng)處理)。但是,許多細(xì)胞系也可采用懸浮培養(yǎng)。
4、由于新生牛血清在兩種培養(yǎng)體系中發(fā)揮的作用有所區(qū)別,如貼壁培養(yǎng)血清主要提供貼壁因子和營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),而懸浮培養(yǎng)則主要提供促細(xì)胞生長(zhǎng)的因子;其主要的應(yīng)用范圍一般來(lái)說(shuō),主要有以下這些!
5、新生牛血清在動(dòng)物細(xì)胞懸浮培養(yǎng)的應(yīng)用中依據(jù)細(xì)胞是否具有貼壁依賴(lài)性,分為動(dòng)物細(xì)胞全懸浮細(xì)胞培養(yǎng)和動(dòng)物細(xì)胞微載體懸浮培養(yǎng);全懸浮細(xì)胞(如BHK21懸浮細(xì)胞株)可以在生物反應(yīng)器中直接進(jìn)行生產(chǎn)增殖,具有細(xì)胞自由生長(zhǎng)、培養(yǎng)環(huán)境均一、取樣簡(jiǎn)單、培養(yǎng)操作簡(jiǎn)單可控、放大方便、污染率和成本低的特點(diǎn)。
6、貼壁細(xì)胞(ST、Vero細(xì)胞等)在生物反應(yīng)器中懸浮培養(yǎng)時(shí)需要借助介質(zhì)表面,通常是微載體,其細(xì)胞所能達(dá)到的濃度和生產(chǎn)產(chǎn)品的產(chǎn)量依賴(lài)于微載體提供的生長(zhǎng)表面積;微載體為動(dòng)物細(xì)胞生長(zhǎng)提供了便利的表面,具有極大的培養(yǎng)表面積/體積比,它能夠?qū)崿F(xiàn)細(xì)胞高密度培養(yǎng),是目前貼壁動(dòng)物細(xì)胞大規(guī)模培養(yǎng)使用的主要介質(zhì)。
7、在懸浮培養(yǎng)中,生產(chǎn)抗體藥物的CHO細(xì)胞、生產(chǎn)流感(禽流感)疫苗的MDCK細(xì)胞等已經(jīng)采用無(wú)血清培養(yǎng);但在BHK21細(xì)胞全懸浮培養(yǎng)的口蹄疫疫苗生產(chǎn)中,牛血清仍然被廣泛使用。
8、在南美和印度,口蹄疫疫苗生產(chǎn)通常添加10%左右成牛血清,而國(guó)內(nèi)企業(yè)采用低血清培養(yǎng)基彌補(bǔ)了基礎(chǔ)細(xì)胞培養(yǎng)基的不足;但是,牛血清中的一些促細(xì)胞生長(zhǎng)的成分還是無(wú)法被替代,通常會(huì)在培養(yǎng)基中添加1%-3%的牛血清,同時(shí)它還起著調(diào)節(jié)培養(yǎng)液酸堿度的作用。
9、為使培養(yǎng)體系保持良好的混合狀態(tài)和分散性,從而提高細(xì)胞生長(zhǎng)量,需對(duì)培養(yǎng)體系進(jìn)行攪拌,這時(shí)培養(yǎng)基中的牛血清即可以降低細(xì)胞的機(jī)械損傷;總而言之,牛血清因有著細(xì)胞生長(zhǎng)必須的營(yíng)養(yǎng)成份,所以具有極為重要的功能。
10、主要用于原代細(xì)胞培養(yǎng)、傳代細(xì)胞培養(yǎng)及病毒疫苗的研制和生產(chǎn);對(duì)培養(yǎng)中的細(xì)胞起到某些保護(hù)作用。
前面我們講過(guò)新生牛血清有很多的操作手法,所以在價(jià)格上也有所不同,上海遠(yuǎn)慕動(dòng)血清廠家長(zhǎng)期現(xiàn)貨供應(yīng)不同類(lèi)別的【進(jìn)口 國(guó)產(chǎn)】動(dòng)物血清,包含有新生牛血清,胎牛血清,大牛血清,小牛血清,馬血清,山羊血清,綿羊血清,大鼠血清,小鼠血清,雞血清,狗血清,豚鼠血清及其他動(dòng)物等,品種齊全,價(jià)格實(shí)惠,歡迎訂購(gòu)!
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