油紅O染色液(培養(yǎng)細(xì)胞專用)操作步驟

產(chǎn)品名稱：油紅O染色液(培養(yǎng)細(xì)胞專用)
英文名稱：Oil Red O stain kit(For Cultured Cells)
儲存條件：2-8℃，避光，有效期6個(gè)月
單位：瓶
規(guī)格：4*20ml 4*50ml

簡介：脂質(zhì)(Lipid)是中性脂肪、類脂及其衍生物的總稱，其共同的物理特性是不溶于水，易溶于有機(jī)溶劑(如乙醇、乙醚等)。人體的脂肪主要有兩種：1、儲存脂肪，如中性脂肪，主要分布于皮下、腎、胰腺等部位。2、結(jié)構(gòu)脂肪，如類脂(磷脂、糖脂、膽固醇等)，主要分布于細(xì)胞內(nèi)。中性脂肪(Neutral fat)是由三分子脂肪酸和一分子甘油組成的脂類，呈中性。中性脂肪是儲存能量的方式之一，在氧化時(shí)釋放出能量。中性脂肪染色經(jīng)常采用蘇丹Ⅱ、蘇丹Ⅲ、蘇丹Ⅳ、蘇丹黑B、油紅O法等。傳統(tǒng)方法采用蘇丹染料，最近發(fā)現(xiàn)偶氮染料油紅O更適合脂肪的染色。油紅O是很強(qiáng)的脂溶劑和染脂劑，較易不甘油三脂結(jié)合呈小脂滴狀，不磷脂結(jié)合力稍差，其染色原理一般認(rèn)為是物理上的溶液作用或吸附作用，借溶液作用使脂肪染色。染料在細(xì)胞內(nèi)脂質(zhì)的溶解度較原溶劑中的溶解度更大，所以在染色時(shí)染料就從有機(jī)溶劑轉(zhuǎn)移入脂質(zhì)而使脂肪染色。

油紅O染色液(細(xì)胞專用)簡稱ORO染色液，可顯示最小的脂滴，可優(yōu)先為脂類從溶劑中吸附染料。標(biāo)本不采用含有乙醇的固定液，如需要固定可采用10%福爾馬林)。脂肪陽性染色結(jié)果呈橘黃至紅色，但具體顏色因脂質(zhì)濃度而定。

使用方法
1、培養(yǎng)好的細(xì)胞樣品固定于CellOROFixative15-25min。
2、PBS緩沖液或生理鹽水稍沖洗，稍晾干。
3、(可選)60%異丙醇滴洗20～30s。
4、滴加油紅O染色液，密閉染色10～15min。
5、分色:入60%異丙醇稍洗以便去除染液。
6、PBS緩沖液或生理鹽水稍沖洗。
7、入Mayer蘇木素染色液，復(fù)染核1～2min。
8、(可選)入OROBuffer1min。
9、晾干，鏡檢。

染色結(jié)果：
中性脂肪  橙紅色或橘紅色
細(xì)胞核   藍(lán)色

注意事項(xiàng)：
1、ORO染色液不夠穩(wěn)定，易產(chǎn)生沉淀，不宜提前配制。
2、Mayer蘇木素染色液復(fù)染時(shí)間不能過長。
3、染色結(jié)果不能長期保存，應(yīng)盡快觀察及照相。
4、為了您的安全和健康，請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。