改良Van Gieson染色液操作步驟
2021-08-31 14:10 來源:上海遠(yuǎn)慕生物試劑
產(chǎn)品名稱:改良Van Gieson染色液
英文名稱:Modified Van Gieson Ponceau S stain
儲(chǔ)存條件:4℃,避光,12個(gè)月
單位:瓶
規(guī)格:4×50ml
產(chǎn)品概述:膠原纖維(Collagen Fiber)是結(jié)締組織中分布最廣含量最多的一種纖維,廣泛分布于各種臟器,其中皮膚、鞏膜、肌腱最豐富。Van Gieson膠原纖維染色原理與陰離子染料分子的大小和組織的滲透有關(guān)。分子的大小由分子量來體現(xiàn),小分子量易穿透結(jié)構(gòu)致密、滲透性低的組織,而大分子量則只能迚入結(jié)構(gòu)疏松的、滲透性高的組織。PA分子量小,麗春紅和復(fù)紅次之,淡綠分子量最大。VG染色后,肌纖維呈黃色,膠原纖維呈紅色。
改良Van Gieson染色液采用天青石藍(lán)和Mayer蘇木素染細(xì)胞核,使染色效果更好,保存時(shí)間液較長(zhǎng)。麗春紅染色采用麗春紅S,不易褪色。常用于區(qū)分膠原纖維和肌纖維,可區(qū)分是膠原纖維源性腫瘤還是肌源性腫瘤,觀察組織或器官的損傷、修復(fù)與纖維化程度。
使用方法
1、組織固定于10%福爾馬林固定液中,常規(guī)脫水包埋。
2、切片厚4~5μm,常規(guī)脫蠟至水。
3、VG天青石藍(lán)染色液滴染2~3min。
4、稍水洗。
5、Mayer蘇木素染色液滴染2~3min。
6、稍水洗。
7、酸性乙醇分化液分化1~2s。
8、流水沖洗10min。
9、用配制好的改良VG染液滴染1~2min。
10、急速用水洗一下,即用95%乙醇快速分化脫水。
11、無水乙醇脫水3次,每次5~10s。
12、二甲苯透明3次,每次1~2min。中性樹膠封固。
染色結(jié)果
膠原纖維 鮮紅色
肌纖維、胞質(zhì)及紅細(xì)胞 黃色
細(xì)胞核 藍(lán)褐色
注意事項(xiàng)
1、酸性乙醇分化液常規(guī)是1~2s,在分化完畢和流水沖洗后,應(yīng)在顯微鏡下作觀察。如細(xì)胞核染色過深,可再分化0.5~1s。如過淡,可再染VG天青石藍(lán)液和Mayer蘇木精液1次,然后再經(jīng)酸性乙醇分化。
2、改良VG染液分為D1、D2,臨用時(shí)按所需要的比例(1:9)混合,如染膠原含量少的組織,可按1:7混合。
3、經(jīng)改良VG染色后,水洗或95%的乙醇洗時(shí)都要迅速,避免把麗春紅S和PA洗掉。
4、改良VG液染色后,可不經(jīng)水洗,直接滴入95%的乙醇分化,然后經(jīng)無水乙醇迅速脫水,這樣兩者的色澤較鮮麗。但有時(shí)會(huì)出現(xiàn)分化不均勻,故可急速用水洗一下后再用95%的乙醇分化。
5、為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。