牛血清白蛋白(Bovine Serum Albumin, BSA)是牛血清中的一種球蛋白,又稱第五組分(需要注意的是,第五組分并不是BSA的一種組份,而是Edwin J. Cohn教授早期從血液中通過(guò)特定的分離技術(shù)得到5種組份,其中第五種就是白蛋白),CAS號(hào)為9048-46-8,包含583個(gè)氨基酸殘基,分子量為 66.430 kDa,等電點(diǎn)為4.7。
牛血清白蛋白在生化實(shí)驗(yàn)中有廣泛的應(yīng)用,例如在western blot中作為封閉試劑。
無(wú)免疫球蛋白IgG牛血清白蛋白產(chǎn)品血液中的白蛋白主要起維持滲透壓作用、PH緩沖作用、
載體作用和營(yíng)養(yǎng)作用。在動(dòng)物細(xì)胞無(wú)血清培養(yǎng)中,添加白蛋白可起到生理和機(jī)械保護(hù)作用和載體作用。
血清白蛋白在生化實(shí)驗(yàn)中有廣泛的應(yīng)用,例如在免疫印跡Western Blot中作為封閉試劑。
然而絕大多數(shù)商品化的BSA,甚至高純度BSA內(nèi)都含有IgG,而這些IgG分子就不可避免的會(huì)形成交叉反應(yīng)。
BSA內(nèi)含有的 IgG是牛來(lái)源的IgG分子,而由于牛與山羊、綿羊的同源性,因此在二抗是抗牛IgG、抗山羊IgG(牛來(lái)源的抗山羊IgG例外)、抗綿羊IgG等時(shí)就更 加明顯。
在很多實(shí)驗(yàn)里,即使BSA中的IgG含量很低,也因?yàn)榇罅渴褂肂SA封閉而導(dǎo)致形成很高的背景。
如何選擇合適的牛血清白蛋白(BSA)?
由于牛血清白蛋白(BSA)具有多種產(chǎn)品樣式,可滿足不同種的應(yīng)用。
目前網(wǎng)上的信息大多模棱兩可,有牛血清白蛋白,也有牛血清白蛋白v組分等,很多供貨商對(duì)其區(qū)別也是不清楚的;另外,市場(chǎng)上還提供無(wú)蛋白酶、無(wú)DNase及無(wú)RNase、無(wú)脂肪酸、微生物級(jí)、試劑級(jí)、診斷分析級(jí)等不同等BSA粉末,因此如何選擇合適的BSA產(chǎn)品是很重要的前提。
一般來(lái)說(shuō),普通的BSA粉末或者第五組分適合于細(xì)胞和組織培養(yǎng),也可以用于一些蛋白補(bǔ)充物;而其它無(wú)蛋白酶、 無(wú)DNase及無(wú)RNase、無(wú)脂肪酸等處理的BSA則適合于更多的免疫學(xué)、蛋白學(xué)等應(yīng)用,作為封閉劑、蛋白Marker、半抗原載體以及蛋白穩(wěn)定劑等。