Fraser增菌液(FB1、FB2)基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)步驟
2021-07-28 13:39 來(lái)源:上海遠(yuǎn)慕生物試劑
產(chǎn)品名稱(chēng):Fraser增菌液(FB1、FB2)基礎(chǔ)
英文名稱(chēng):Fraser Enrichment Base
產(chǎn)品規(guī)格:250g
用 途:用于李斯特氏菌的選擇性增菌培養(yǎng)(SN/T 0184-2005),需與Fraser肉湯Ⅰ(FB1)配套試劑和Fraser肉湯Ⅱ(FB2)配套試劑配套使用。
Fraser增菌液(FB1、FB2)基礎(chǔ)樣品處理:
標(biāo)本可以是液體也可以是固體,液體標(biāo)本可以直接使用,固體標(biāo)本需用適量無(wú)菌生理鹽水溶解后,取溶液使用。根據(jù)濃度需要決定是否采用10倍稀釋法進(jìn)行稀釋。
實(shí)驗(yàn)材料:天平或臺(tái)秤,高壓蒸汽滅菌鍋。玻璃器皿 移液管、試管、燒杯、量筒、錐形瓶、培養(yǎng)皿、玻璃漏斗等。藥匙、稱(chēng)量紙、pH試紙、記號(hào)筆、棉花、紗布、線繩、塑料試管蓋、牛皮紙、報(bào)紙等。
培養(yǎng)基pH的初步調(diào)整:
培養(yǎng)基各成分完全溶解后,應(yīng)進(jìn)行pH 的初步調(diào)正,因培養(yǎng)基在加熱消毒過(guò)程中、pH 會(huì)有所變化,例如,牛肉浸液約可降低pH0.2.而腸浸液pH 卻會(huì)有顯著的升高。因此,對(duì)這個(gè)步驟,操作者應(yīng)隨時(shí)注意探索經(jīng)驗(yàn)、以期能掌握培養(yǎng)基的終pH ,保證培養(yǎng)基的質(zhì)量。pH 調(diào)正后,還應(yīng)將培養(yǎng)基煮沸數(shù)分鐘,以利培養(yǎng)基沉淀物的析出。
使用方法
脫水干粉培養(yǎng)基使用:稱(chēng)取本品干粉 29g,加入 1L 蒸餾水或去離子水。攪拌加熱煮沸至完全溶解121℃15min 高壓蒸汽滅菌,冷至約 50℃,于121℃高壓滅菌 15min,冷卻至 50℃左右時(shí),用 11mol/L 的硫酸調(diào)節(jié) pH 至 4.0,混勻,傾注平板。(注:配制不同用量體積,可按比例擴(kuò)增或縮小。)取 0.1mL樣品液或培養(yǎng)液接種至此平板表面,于 45±2℃培養(yǎng) 3~5d。
【質(zhì)量控制】
1. 外觀方面
干粉基礎(chǔ):流動(dòng)性良好的淡黃色粉末。
平板凝膠:淡黃色凝膠。
2. 生物學(xué)方面
下列菌株接種后于于 45±2℃培養(yǎng) 3~5d 生長(zhǎng)情況如下表:
菌株 培養(yǎng)時(shí)間 生長(zhǎng)情況
酸土脂環(huán)芽孢桿菌 ATCC49025
45±2℃培養(yǎng)3~5d
生長(zhǎng)良好
酸熱脂環(huán)芽孢桿菌 ATCC27009 生長(zhǎng)良好
大腸埃希氏菌 ATCC25922 不生長(zhǎng)
金黃色葡萄球菌 ATCC6538 不生長(zhǎng)
【儲(chǔ)存條件及保質(zhì)期】
脫水干粉培養(yǎng)基:貯存于避光、陰涼干燥處;貯存期三年。用后立即旋緊瓶蓋,防止受潮等。
【注意事項(xiàng)】
1、稱(chēng)量時(shí)注意粉塵,佩戴口罩操作以避免引起不適。
2、干粉培養(yǎng)基使用后立即旋緊瓶蓋,避免吸潮結(jié)塊。貯存于避光、陰涼干燥處。未開(kāi)封產(chǎn)品保
質(zhì)期三年。開(kāi)封后根據(jù)存放條件的不同保質(zhì)時(shí)間存在一定的差異。
【廢物處理】
檢測(cè)之后帶菌試管及平板置于 121℃下高壓滅菌 30 分鐘處理。
【執(zhí)行標(biāo)準(zhǔn)】
Q/HKSJ 03 普通微生物培養(yǎng)基