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核黃素轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白2抗體應(yīng)用說(shuō)明

2021-07-01 13:55 來(lái)源:上海遠(yuǎn)慕生物試劑
中文名稱:核黃素轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白2抗體
英文名稱:CT054
產(chǎn)品規(guī)格:0.1ml/0.2ml
研究領(lǐng)域腫瘤免疫學(xué)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)新陳代謝
抗體來(lái)源Rabbit
克隆類型Polyclonal
交叉反應(yīng)Human,Mouse,Rat,Dog,Cow,
產(chǎn)品應(yīng)用WB=1:500-2000ELISA=1:500-1000IHC-P=1:400-800IHC-F=1:400-800IF=1:100-500(石蠟切片需做抗原修復(fù))
notyettestedinotherapplications.
optimaldilutions/concentrationsshouldbedeterminedbytheenduser.
分子量51kDa
細(xì)胞定位細(xì)胞膜
性狀LyophilizedorLiquid
濃度1mg/1ml
免疫原KLHconjugatedsyntheticpeptidederivedfromhumanCT054/C20orf54
亞型IgG
純化方法affinitypurifiedbyProteinA
儲(chǔ)存液0.01MTBS(pH7.4)with1%BSA,0.03%Proclin300and50%Glycerol.
保存條件Storeat-20°Cforoneyear.Avoidrepeatedfreeze/thawcycles.Thelyophilizedantibodyisstableatroomtemperatureforatleastonemonthandforgreaterthanayearwhenkeptat-20°C.WhenreconstitutedinsterilepH7.40.01MPBSordiluentofantibodytheantibodyisstableforatleasttwoweeksat2-4°C.



核黃素轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白2抗體免疫組化染色:
一抗孵育(Primaryantibodyincubation)
參考一抗的說(shuō)明書(shū),按照適當(dāng)比例用Western一抗稀釋液稀釋一抗。
用微型臺(tái)式真空泵吸盡封閉液,立即加入稀釋好的一抗,室溫或4℃在側(cè)擺搖床上緩慢搖動(dòng)孵育一小時(shí)。如果一抗孵育一小時(shí)效果不佳,可以在4℃緩慢搖動(dòng)孵育過(guò)夜?;厥找豢?。加入Western洗滌液,在側(cè)擺搖床上緩慢搖動(dòng)洗滌5-10分鐘。吸盡洗滌液后,再加入洗滌液,洗滌5-10分鐘。共洗滌3次。如果結(jié)果背景較高可以適當(dāng)延長(zhǎng)洗滌時(shí)間并增加洗滌次數(shù)。

二抗孵育(Secondaryantibodyinucubation)
參考二抗的說(shuō)明書(shū),按照適當(dāng)比例用Western二抗稀釋液稀釋辣根過(guò)氧化物酶(HRP)標(biāo)記的二抗。
用微型臺(tái)式真空泵吸盡洗滌液,立即加入稀釋好的二抗,室溫或4℃在側(cè)擺搖床上緩慢搖動(dòng)孵育一小時(shí)。回收二抗,加入Western洗滌液,在側(cè)擺搖床上緩慢搖動(dòng)洗滌5-10分鐘。吸盡洗滌液后,再加入洗滌液,洗滌5-10分鐘。共洗滌3次。如果結(jié)果背景較高可以適當(dāng)延長(zhǎng)洗滌時(shí)間并增加洗滌次數(shù)。

蛋白檢測(cè)(Detectionof proteins)
參考相關(guān)說(shuō)明書(shū),使用BeyoECL,Western熒光檢測(cè)試劑等ECL類試劑來(lái)檢測(cè)蛋白。
洗片時(shí)可以使用X光片自動(dòng)洗片機(jī)。如果沒(méi)有自動(dòng)洗片機(jī),可以用顯影定影試劑盒自行配制顯影液和定影液進(jìn)行手工洗片。
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