糖原PAS染色液(真菌專用)操作步驟

中文名稱：糖原PAS染色液(真菌專用)
產(chǎn)品規(guī)格：3×20mL|3×50mL
用途：大多數(shù)真菌染色(曲菌、白色念珠菌、組織胞漿菌、馬爾尼菲青霉菌、新型隱球菌等)
注意事項：又叫真菌染色液(McManus PAS法)，尤其適用于曲菌、白色念珠菌染色。真菌呈紫色，胞核呈藍(lán)色。
儲存條件：4℃，避光，12個月

產(chǎn)品簡介：糖原染色是病理學(xué)中常規(guī)的染色方法之一，McManus在1946年最先使用PAS技術(shù)顯示黏蛋白，該法常用來顯示糖原和其他多糖，該技術(shù)不僅能顯示糖原，還能顯示中性黏液性物質(zhì)和某些酸性物質(zhì)以及軟骨、垂體、霉菌、真菌、色素、淀粉樣物質(zhì)、基底膜等。糖類及有關(guān)物質(zhì)中的1，2-乙二醇基被氧化為二醛，醛與Schiff試劑能結(jié)合成一種品紅化合物，產(chǎn)生紫紅色。氧化劑還可氧化細(xì)胞內(nèi)其他物質(zhì)，使用時應(yīng)注意選擇好氧化劑濃度和氧化時間，使氧化控制在既能把乙二醇基氧化成醛基又不至于過氧化，這是很關(guān)鍵的步驟。

糖原PAS染色液(真菌專用)利用真菌含有多糖，氧化劑氧化真菌壁上的多糖而暴露出醛基，醛基與無色Schiff結(jié)合呈現(xiàn)紅色。該染色法性能穩(wěn)定，特異性強(qiáng)；操作簡捷，僅需0.5h;濃度低氧化劑更適用于對真菌染色，無鹽酸乙醇分化液分化步驟。

操作步驟(僅供參考)：
1、常規(guī)固定(常采用10%福爾馬林),常規(guī)脫水包埋。
2、細(xì)胞涂片入蒸餾水(無需包埋、脫蠟)或組織切片脫蠟入蒸餾水。
3、入氧化劑室溫氧化10min。
4、自來水沖洗2次，蒸餾水浸洗2次。
5、入SchiffReagent并加蓋，置于室溫陰暗處浸染10～20min。
6、亞硫酸鈉溶液滴洗2次，每次2min。
7、流水沖洗2min。
8、逐級常規(guī)乙醇脫水。二甲苯透明，中性樹膠封固。

染色結(jié)果：
真菌    紫紅色
細(xì)胞質(zhì)  深淺不一的紅色
備注：顏色深淺很大程度上取決于樣品在氧化劑和SchiffReagent中作用時間的長短。

陰性對照(可選)：
1、取淀粉酶1g溶解于PBS(pH5.3)100ml，處理30～60min，與其他樣本共同入氧化劑。結(jié)果應(yīng)為陰性。
2、(備選方案)取唾液片(過濾后用)處理30～60min，與其他樣本共同入氧化劑。結(jié)果應(yīng)為陰性。
3、(備選方案)如果對照片采用其自身樣本，對照片不經(jīng)氧化劑這一步，直接入SchiffReagent。結(jié)果應(yīng)為陰性。