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糖原PAS染色液(細(xì)胞專用)說明書

2021-05-20 14:02 來源:上海遠(yuǎn)慕生物試劑
中文名稱:糖原PAS染色液(細(xì)胞專用)
產(chǎn)品規(guī)格:5×20mL|5×50mL
保存:4℃避光,12個(gè)月
分類:碳水染色
用途:經(jīng)典的糖原染色法,不僅能夠顯示糖原,還能顯示中性黏液性物質(zhì)和某些酸性物質(zhì),特別適用于細(xì)胞、極其薄的切片。
注意事項(xiàng):細(xì)胞的糖原染色中推薦采用該染色液,是經(jīng)典糖原染色法,高碘酸和schiff試劑應(yīng)低溫保存。染色結(jié)果為:PAS反應(yīng)陽性物質(zhì)(糖原或多糖)均呈紅色或紫紅色;細(xì)胞核呈藍(lán)色。

簡介:糖原染色是病理學(xué)中常規(guī)的染色方法之一,McManus在1946年蕞先使用高碘酸-雪夫技術(shù)顯示黏蛋白,該法常用來顯示糖原和其他多糖,該技術(shù)不僅能顯示糖原,還能顯示中性黏液性物質(zhì)和某些酸性物質(zhì)以及軟骨、垂體、霉菌、真菌、色素、淀粉樣物質(zhì)、基底膜等。氧化劑能氧化糖類及有關(guān)物質(zhì)中的1,2-乙二醇基,使之變?yōu)槎?,醛與Schiff試劑能結(jié)合成一種品紅化合物,產(chǎn)生紫紅色。由于氧化劑還可氧化細(xì)胞內(nèi)其他物質(zhì),使用時(shí)應(yīng)注意選擇好氧化劑的濃度和氧化時(shí)間,使氧化控制在既能把乙二醇基氧化成醛基又不至于過氧化,這是很關(guān)鍵的步驟。

糖原PAS染色液(細(xì)胞專用)大大增強(qiáng)了染色效果;性能穩(wěn)定,特異性強(qiáng);操作簡捷,僅需1h;氧化劑、蘇木素濃度更低,geng適用于細(xì)胞、超薄組織切片染色;無鹽酸乙醇分化步驟。該試劑盒僅適用于科研領(lǐng)域。


操作步驟(僅供參考):
1、細(xì)胞、骨髓涂片用PAS固定液固定10~15min。
2、水洗、晾干。
3、入氧化劑,室溫氧化15-20min。
4、自來水沖洗2次,蒸餾水浸洗2次。
5、入SchiffReagent并加蓋,置于室溫陰暗處浸染10~20min。
6、亞硫酸鈉溶液滴洗2次,每次2min。該步驟亦可省略。
7、流水沖洗2min。
8、入Mayer蘇木素染色液,復(fù)染1~2min。水洗、晾干、鏡檢。

染色結(jié)果:
PAS反應(yīng)陽性物質(zhì)(糖原或多糖)    紅色或紫紅色
細(xì)胞核                        藍(lán)色
細(xì)胞質(zhì)                        深淺不一的紅色
備注:顏色深淺很大程度上取決于樣品在氧化劑和SchiffReagent中作用時(shí)間的長短。

陰性對(duì)照(可選):
1、取淀粉酶1g溶解于PBS(pH5.3)100ml,處理30~60min,與其他樣本共同入氧化劑。結(jié)果應(yīng)為陰性。
2、(備選方案)取唾液片(過濾后用)處理30~60min,與其他樣本共同入氧化劑。結(jié)果應(yīng)為陰性。
3、(備選方案)如果對(duì)照片采用其自身樣本,對(duì)照片不經(jīng)氧化劑這一步,直接入SchiffReagent。結(jié)果應(yīng)為陰性。

注意事項(xiàng):
1、氧化劑氧化時(shí)間不宜過久,氧化時(shí)的溫度以18~22℃蕞佳。
2、過碘酸溶液、SchiffReagent使用時(shí)避免接觸過多的陽光和空氣,使用前蕞好提前30min取出恢復(fù)至室溫,避光暗處使用。
3、過碘酸溶液和SchiffReagent中作用時(shí)間非常重要,該依據(jù)切片厚薄、細(xì)胞或組織的類別等決定。
4、如常規(guī)切片建議用糖原PAS染色液,因?yàn)槠溥^碘酸溶液和蘇木素溶液濃度都相對(duì)高。
5、為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
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