甲苯胺藍(lán)-DNA瓊脂使用方法

產(chǎn)品名稱：甲苯胺藍(lán)-DNA瓊脂
英文名稱：Toluidine Blue-DNA Agar
規(guī)格:250g
有效期：三年
用途：甲苯胺藍(lán)-DNA瓊脂用于金黃色葡萄球菌的耐熱核酸酶的試驗(yàn)。
貯 存： 甲苯胺藍(lán)-DNA瓊脂于2～8℃避光貯存

原 理：
具有脫氧核糖核酸酶的細(xì)菌分解培養(yǎng)基中的脫氧核糖核酸(DNA)，使DNA長(zhǎng)鏈水解成數(shù)個(gè)單核苷酸的寡核苷酸短鏈，使指示劑甲苯胺藍(lán)作用變成粉紅色;氯化鈣提供陽(yáng)離子作為激活劑;氯化鈉維持均衡的滲透壓;三羥甲基氨基甲烷為緩沖劑;瓊脂為培養(yǎng)基的凝固劑。

配方(每升)：
脫氧核糖核酸(DNA)  0.3g
氯化鈣  0.0011g
氯化鈉  10g
甲苯胺藍(lán)  0.083g
三羥甲基氨基甲烷  6.1g
瓊脂   10g
蕞終pH  9.0±0.2
    
使用方法：
1. 稱取 甲苯胺藍(lán)-DNA瓊脂26.5g，加入蒸餾水或去離子水1 L，攪拌加熱煮沸至完全溶解，分裝三角瓶，115℃高壓滅菌15min(即用可不需滅菌)，備用。
2. 載玻片的制備：取3mL甲苯胺藍(lán)-DNA瓊脂平鋪于在載波片上制成標(biāo)本，待瓊脂凝固后，在瓊脂上打成直徑2mm的小洞(每個(gè)載玻片10-12個(gè))，抽出小洞中的瓊脂塊。
3.從Baird-parker平板挑一個(gè)可疑單菌落接種普通肉湯培養(yǎng)基中，36±1℃培養(yǎng)20h～24h后，經(jīng)過(guò)100℃沸水煮15min,取0.01mL接種所制備的載玻片上小洞，于35℃培養(yǎng)4h后，觀察結(jié)果。

質(zhì)量控制：
質(zhì)控菌株接種后，于35℃培養(yǎng)4h結(jié)果如下：按標(biāo)簽用法制備培養(yǎng)基，接種以下質(zhì)控菌株，放置36±1℃需氧培養(yǎng)24±2小時(shí)。