微生物培養(yǎng)基使用中常出現(xiàn)的問題及解答！

微生物培養(yǎng)基使用中常出現(xiàn)的問題及解答

    1、培養(yǎng)基煮沸溶解后再高壓滅菌，還是直接高壓滅菌存在疑惑。拿麥康凱瓊脂舉個例子，溶解后滅菌，平板上沒有不溶的結(jié)晶紫，沒有紫色的斑點；相對比未溶解滅菌的，平板上有結(jié)晶紫和紫色的斑點。所以正確的做法是先煮沸溶解后再高壓滅菌。

    2、培養(yǎng)基PH值為什么不在標準范圍內(nèi)？

    其實出現(xiàn)這個情況的問題有很多種，大致我分為這么6大點：質(zhì)量不好（生產(chǎn)廠家出廠時PH就不正確）滅菌問題（高壓滅菌溫度過高或滅菌時間過長，導致葡萄糖類焦化從而PH降低）保存時間（超過保質(zhì)期或結(jié)塊）水質(zhì)出現(xiàn)問題（可以用去離子水、純化水、蒸餾水不能用礦泉水、自來水）保存溫度（保存溫度過高）光線直射 總結(jié)本人認為以上6點都可能導致培養(yǎng)基PH出現(xiàn)偏差，如果出現(xiàn)此類問題，建議逐一排查，直到問題解決

    3、培養(yǎng)基高壓滅菌時為什么會焦化？

    不少檢驗人員在實驗時，發(fā)現(xiàn)經(jīng)過滅菌的培養(yǎng)基有焦化現(xiàn)象，我認為引起此現(xiàn)象的主要原因有以下4點：可能你滅菌的時候溫度超過了121（正常115-11620min即可）滅菌時間過長培養(yǎng)基在容器中裝的太多（不要超過容器容量的80%）滅完菌的培養(yǎng)基在高溫環(huán)境中保存的時間過長，這些都會導致培養(yǎng)基發(fā)生焦化現(xiàn)象

    4、培養(yǎng)基PH怎么測定？

    通常分兩種情況：對于無需高壓滅菌的培養(yǎng)基，先煮沸溶解后再冷卻至25時，測定其PH值（固體培養(yǎng)基至少測2個點，取其平均值）對于需要高壓滅菌的培養(yǎng)基，高壓滅菌后，冷卻至25測其PH（固體培養(yǎng)基至少測2個點，取其平均值）

    5、含瓊脂培養(yǎng)基在倒平板為什么有時候不凝固或凝固不好？

    針對以上情況，我做了分析：針對需要高壓滅菌的培養(yǎng)基，倒平板時候要先搖勻（因為瓊脂分子量比較大，在冷卻過程中容易沉淀到底部，導致瓊脂分散不均勻）針對無需高壓滅菌的培養(yǎng)基，一次煮沸溶解后不能直接倒平板，應(yīng)重復煮沸溶解3-5次（因為一次不能確保瓊脂完全溶解）

    6、為什么同一品牌的不同批號，粉末顏色有差別？

    分析可能有3個原因：此培養(yǎng)基成分含有染料或指示劑不同批次粉末培養(yǎng)基含水量不同，一般要求≤6%，含水量越高，顏色越深加工時球磨時間越長顏色越深

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    培養(yǎng)基PH值不在標準范圍內(nèi)的原因：

    1、質(zhì)量不好（生產(chǎn)廠家出廠時PH就不正確。

    2、滅菌問題（高壓滅菌溫度過高或滅菌時間過長，導致葡萄糖類焦化從而PH降低）。

    3、保存時間（超過保質(zhì)期或結(jié)塊）。

    4、水質(zhì)出現(xiàn)問題（可以用去離子水、純化水、蒸餾水不能用礦泉水、自來水）。

    5、保存溫度（保存溫度過高）。

    6、光線直射 。