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GenGreen核酸染料特點和安全性測試

2020-05-14 10:59 來源:上海遠慕生物試劑
    在電泳實驗或其他核酸分離實驗中,常用EB來識別和顯示核酸條帶。EB被紫外線照射時能發(fā)出紅褐色的熒光。盡管EB是一種高效的顯色劑,但它的高危險性要求特殊的安全管理和回收流程。

    EB是一種強誘變劑(可能造成遺傳性危害),直接接觸有中等毒性。EB可以通過皮膚吸收,因此應當避免一切與EB的直接接觸。

    致力于凝膠電泳實驗的安全性,我公司*新研發(fā)的核酸熒光染料—GenGreen和藍光切膠儀,解決了電泳實驗染料毒性和紫外線對人體和核酸的傷害困擾。

    GenGreen染料使用過程簡單,穩(wěn)定性好,同時因為其跑膠帶型好,靈敏度高,背景低,而深受廣大用戶喜愛。

    GenGreen核酸染料特點:

    1.安全無毒

    獨特的油性和大分子特點,使其熱穩(wěn)定性好,不易揮發(fā),不能穿透細胞膜,安全無毒。是新一代替代EB的*佳核酸熒光染料。

    2.與藍色可見光激發(fā)裝置完美結合

    藍光切膠,雙重安全。GenGreen核酸染料既適用于 254 nm紫外凝膠成像系統(tǒng)(與EB相同光譜特性),又與藍色可見光激發(fā)裝置完美結合,使用藍光切膠儀切膠,既避免了紫外切膠對操作人員眼睛和皮膚造成的傷害,又避免了紫外對核酸產物的損傷。

    3.高靈敏度,低背景

    GenGreen核酸染料熒光信號強,背景信號低,具有高信噪比,在紫外成像下靈敏度與EB相當,但在藍光下靈敏度比EB更高,使用也更加靈活方便。

    4.穩(wěn)定性極好

    適用于微波或其他方法加熱,可以在室溫下保存。

    5.廣泛的適應性

    適用于預制凝膠和凝膠電泳后染色,可用于瓊脂糖凝膠或聚丙烯酰胺凝膠電泳; dsDNA、ssDNA或

    RNA染色。

    6.操作簡單:使用方法同EB

    GenGreen激發(fā)光譜

    Ex(nm):254 Em(nm):504

    GenGreen核酸染料是為了攻克核酸染料毒性問題,而研發(fā)設計的一款油性及大分子物質,因為它的這種特性使其難以穿透細胞膜進入細胞內,正是這一特性降低了染料的細胞毒性。

    相反, 由于SYBR Green I 能快速的被細胞吞入,而廣泛地用于活細胞線粒體和核 DNA 染色。已知 SYBR Green I 對紫外線導致的突變有強烈的增強作用( Ohta et al. Mutat. Res. 492 , 91(2001) ),SYBRGreenI 其高細胞膜透性,使它成為凝膠染色的有害物質。

    分別用SYBR GreenI、GenGreen做細胞毒性試驗測試。

    目的:通過試驗測試GenGreen是否能夠穿透活細胞膜進入細胞核內。

    一:安全性測試

    (A)5min

    GenGreen SYBR Green I

    (B)30min

    GenGreen SYBR Green I

    在37°C下,分別使用1× SYBR Green I, GenGreen 對HeLa 細胞進行孵化,并分別在5分鐘(A)和30分鐘(B)后觀察。實驗顯示SYBR Green I染料迅速進入細胞并將細胞內的核酸染成亮綠色,而GenGreen 則因為不能穿透細胞膜而完全沒有進入細胞內, 足以證明GenGreen是安全的。

    結論:GenGreen因為不能穿透細胞膜而完全沒有進入細胞(Hela細胞)內, 證明GenGreen是安全的。
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