遠(yuǎn)慕生物:生化試劑之常用試劑配置

1、0.5mol/L氫氧化鈉溶液  
組份濃度 0.5mol/L     ；配制量 2L  
配置方法 1.準(zhǔn)確稱取氫氧化鈉40g。

2.用去離子水溶解并稀釋至2L。  2、0.5mol/L鹽酸溶液  
組份濃度 0.5mol/L     ；配制量 2L  
配置方法 1.準(zhǔn)確量取鹽酸83.4mL。 2.用去離子水稀釋至2L。 

3、含 0.5mol/L氯化鈉的 0.5mol/L氫氧化鈉溶液  
組份濃度 0.5mol/L氯化鈉、0.5mol/L氫氧化鈉   ；配制量 1L  
配置方法 1.準(zhǔn)確量取氯化鈉29.3g。 2.準(zhǔn)確量取氫氧化鈉20g。 3.用去離子水稀釋至1L。 注意：此溶液供回收纖維素時(shí)使用。 

4、0.2％葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液  
組份濃度 0.2％ ；配制量 1L  
配置方法 1.稱取葡萄糖2.5g置于稱量瓶中，在70℃干燥2小時(shí)。 2.干燥器中冷卻至室溫，重復(fù)干燥，冷卻至恒重。 3.準(zhǔn)確稱取葡萄糖2.000g。 4.用去離子水溶解并定容至1L 5.于4℃保存。 

5、250μg/mL牛血清白蛋白標(biāo)準(zhǔn)液  組份濃度 250μg/mL ；配制量 2L  
配置方法 1.準(zhǔn)確稱取250mg標(biāo)準(zhǔn)牛血清白蛋白。 2.用0.03mol/LpH7.8的磷酸緩沖液溶解并定容至1L。 3.4℃保存。 

6、Folin試劑甲  
配置方法 1.稱取10g氫氧化鈉溶于400mL去離子水中，加入50g無(wú)水碳酸鈉，溶解，待用。2.稱取0.5g酒石酸鉀鈉，溶于80mL去離子水中，加入0.25g硫酸銅?5水，溶解。3.將1：2：去離子水按20：4：1的比例混合即可。 4. 4℃保存，可用一周。  

7、Folin試劑乙  配置方法： 
 
1.在500mL的磨口回流裝置內(nèi)加入鎢酸鈉?2水25.0359g， 鉬酸鈉?2水6.2526g，去離子水175mL，85％磷酸12.5mL， 濃鹽酸25mL，充分混合。 
 
2.回流10小時(shí)，再加硫酸鋰37.5g，去離子水12.5mL及數(shù)滴溴。  

3.然后開口沸騰15min，以驅(qū)除過(guò)量的溴，冷卻后定容到250mL。
  
4.于棕色瓶中保存，可使用多年。

注意：上述制備的Folin試劑乙的貯備液濃度一般在2mol/L左右，幾種操作方案都是把Folin試劑乙稀釋至1mol/L的 濃度作為應(yīng)用液，我們這時(shí)是把貯備液于使用前稀釋18 倍，使之濃度為0.1mol/L略高。這種稀釋18倍后的Folin 試劑乙就是上文稱之為的“應(yīng)用液”。Folin試劑乙貯備 液濃度的標(biāo)定，一般是以酚酞為指示劑。用Folin試劑乙去滴定1mol/L左右的標(biāo)準(zhǔn)氫氧化鈉溶液，當(dāng)溶液顏色由紅變?yōu)樽匣?，再突然變成墨綠即為終點(diǎn)，如果用氫氧化鈉去滴定Folin試劑乙，終點(diǎn)不太好掌握，溶液地顏色是由淺黃變?yōu)闇\綠，再變?yōu)榛易仙珵榻K點(diǎn)。 
 

8、DNS試劑 （3，5-二硝基水楊酸試劑）  
配置方法 1.取3，5-二硝基水楊酸10g,加入2mol/L氫氧化鈉溶液200mL。2.將3，5-二硝基水楊酸溶解，然后加入酒石酸鉀鈉300g。 3. 待其完全溶解，用去離子水稀釋至2000mL，棕色瓶保存。

9、5％蔗糖溶液  
組份濃度 5％ ；配制量 1L  
配置方法 稱取蔗糖50g，用去離子水溶解定容至1L。

10、0.1mol/L蔗糖溶液  
組份濃度 0.1mol/L ；配制量 1L  
配置方法 稱取蔗糖34.230g，用去離子水溶解并定容至1L。 

11、20％乙酸溶液  
組份濃度 20％ ；配制量 1.2L  
配置方法 量取冰乙酸300mL，用去離子水稀釋至1200mL。

12、30％（W/V）Acrylamide  
組份濃度 30％（W/V）Acrylamide 0.05％ ；配制量 1L  
配置方法 1.稱量下列試劑，置于1L燒杯中 Acrylamide 290g 、BIS 10g 2.向燒杯中加入約600mL的去離子水，充分?jǐn)嚢枞芙?3.加入去離子水將溶液定容至1L，用0.45μm濾膜濾去雜質(zhì)。 4.于棕色瓶中4℃保存。 注意：丙稀銑胺具有很強(qiáng)的神經(jīng)毒性，并可通過(guò)皮膚吸收，其作用有積累性，配制時(shí)應(yīng)戴手套等。聚丙烯酰胺無(wú)毒，但也應(yīng)謹(jǐn)慎操作，因?yàn)橛锌赡芎猩倭康奈淳酆铣煞荨?/p>

13、40％（W/V）Acrylamide  
組份濃度 40％（W/V）Acrylamide 0.05％ ；配制量 1L  
配置方法 1.稱量下列試劑，置于1L燒杯中 Acrylamide 380g、BIS 20g  2.向燒杯中加入約600mL的去離子水，充分?jǐn)嚢枞芙?3.加入去離子水將溶液定容至1L，用0.45μm濾膜濾去雜質(zhì)。 4.于棕色瓶中4℃保存。  
     注意：丙稀銑胺具有很強(qiáng)的神經(jīng)毒性，并可通過(guò)皮膚吸收， 其作用有積累性，配制時(shí)應(yīng)戴手套等。聚丙烯酰胺無(wú)毒，但也應(yīng)謹(jǐn)慎操作，因?yàn)橛锌赡芎猩倭康奈淳酆铣煞荨?nbsp;

14、10％（W/V）過(guò)硫酸銨  
組份濃度 10％（W/V）過(guò)硫酸銨；   配制量 10mL  
配置方法 1.稱取1g過(guò)硫酸銨。 2.加入10mL的去離子水后攪拌溶解。 3.貯存于4℃。 注意：10％過(guò)硫酸胺溶液在4℃保存時(shí)間可使用2周左右，超過(guò)期限會(huì)失去催化作用。 

15、考馬斯亮藍(lán)R-250染色液 
組份濃度 0.1％（W/V）考馬斯亮藍(lán)R-250，25%（V/V）異丙醇， 10％（V/V）冰醋酸  配制量 1L  
配置方法 1.稱取1g考馬斯亮藍(lán)R-250,置于1L燒杯中。 2.量取250mL的異丙醇加入上述燒杯中，攪拌溶解。 3.加入100mL的冰乙醋酸，均勻攪拌。 4.加入650mL的去離子水，均勻攪拌。 5.用濾紙出去顆粒物質(zhì)后，室溫保存。 

16、考馬斯亮藍(lán)染色脫色液  
組份濃度 10％（V/V）醋酸，5％（V/V）乙醇     ；配制量 1L  
配置方法 1.量取下列溶液，置于1L燒杯中。 醋酸100mL、 乙醇50mL 、H2O850mL 2.充分混合后使用。

17、凝膠固定液 (SDS-PAGE銀氨染色用)  
組份濃度 50％（V/V）甲醇，10％（V/V）醋酸     ；配制量 100L  
配置方法 1.量取下列溶液，置于1L燒杯中。 甲醇500mL 、醋酸 100mL 、H2O 400mL 2.均勻混合后室溫保存。 

18、凝膠處理液 (SDS-PAGE銀氨染色用)  
組份濃度 50％（V/V）甲醇，10％（V/V）戊二醛     ；配制量 1L  
配置方法 1.量取下列溶液，置于1L燒杯中。 甲醇50mL 、 戊二醛 10mL 、H2O 40mL 2. 均勻混合后室溫保存。 

19、凝膠染色液 (SDS-PAGE銀氨染色用)  
組份濃度 0.4％（W/V）硝酸銀，1％（V/V）濃氨水，0.04％（W/V）氫氧化鈉 ；配制量 100L  配置方法：1.量取下列試劑，加入100～200mL試劑瓶中。 20％硝酸銀 2mL  
濃氨水 1mL 4％氫氧化鈉 1mL H2O 96mL 2.均勻混合。該溶液應(yīng)為無(wú)色透明狀。如氨水濃度過(guò)低時(shí)溶液會(huì)呈現(xiàn)混濁狀，此時(shí)應(yīng)補(bǔ)加濃氨水，直至透明。  3.本染色液應(yīng)現(xiàn)用現(xiàn)配，不宜保存。

20、顯影液 (SDS-PAGE銀氨染色用)  
組份濃度 0.005％（V/V）檸檬酸，0.02％（V/V）甲醛     ；配制量 1L  配置方法 1.稱取下列試劑，置于1L試劑瓶中。 檸檬酸 50mg 甲醛 0.2mL  2.加入1L去離子水后，搖動(dòng)混合后溶解。 3.室溫保存。