天狼星紅和其襯染液都是強(qiáng)酸性染料,易與膠原分子中的堿性基團(tuán)結(jié)合,吸附牢靠。偏振光鏡檢查,膠原纖維有正的單軸雙折射光的屬性,與天狼星紅染色液結(jié)合后,可增強(qiáng)雙折射,提高分辨率,從而區(qū)分兩型膠原纖維。膠原纖維(Collagen Fiber)是結(jié)締組織中分布最廣含量最多的一種纖維,廣泛分布于各種臟器,其中皮膚、鞏膜、肌腱最豐富。天狼星紅染色液的溶劑為襯染PA飽和溶液,主要用于各種組織病變時(shí)對(duì)膠原纖維異?;蚶w維增生的研究中,管等組織的膠原纖維被染成紅色,的幫助作用。
操作說(shuō)明:(僅供參考)
1、組織固定于 10%福爾馬林固定液,常規(guī)脫水包埋。
2、切片厚 6μ m,常規(guī)脫蠟至水。
3、天狼星紅染色液滴染。
4、流水稍微沖洗,去除切片表面染液。
5、Mayer 蘇木素染色液染細(xì)胞核。
6、流水沖洗 10min 。
7、常規(guī)脫水透明,中性樹(shù)膠封固。
染色結(jié)果:
l型膠原纖維:緊密排列,顯示很強(qiáng)的雙折光性,呈黃色或紅色的纖維。
II型膠原纖維:顯示弱的雙折光,呈多種色彩的疏松網(wǎng)狀分布。
III型膠原纖維:顯示弱的雙折光,呈綠色的細(xì)纖維。
lv型膠原纖維:顯示弱的雙折光的基膜,呈淡黃色。
注意事項(xiàng):
1、為使在偏振光鏡下顯示清晰,本法的切片厚度以 6~7μ m 為宜。
2、本法染色穩(wěn)定,不易褪色。
3、為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。