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組蛋白去乙酰化酶1抗體修復(fù)方法

2017-12-04 16:26 來(lái)源：上海遠(yuǎn)慕生物試劑

組蛋白去乙酰化酶1抗體修復(fù)方法由上海遠(yuǎn)慕生物詳細(xì)介紹！

中文名：組蛋白去乙酰化酶1抗體
英文名稱：Anti-HDAC1
供應(yīng)商：上海遠(yuǎn)慕
規(guī)格：0.1ml/0.2ml
產(chǎn)品類型：一抗
濃度：1mg/1ml
克隆類型：polyclonal or monoclonal
抗體來(lái)源：Rabbit or Mouse or Goat
抗體修復(fù)方式：修復(fù)液：0.01M 枸櫞酸（pH6.0）或者0.05M EDTA（pH8.0）
相關(guān)標(biāo)記：Alexa Fluor 350、Alexa Fluor 488、Alexa Fluor 555、Alexa Fluor 647、AP、APC、Biotin、Cy3、Cy5、Cy5.5、Cy7、FITC、Gold、HRP、PE、PE-Cy3、PE-CY5、PE-CY5.5、PE-CY7、RBITC.
產(chǎn)品應(yīng)用：可以用于做石蠟切片免疫組化，冰凍切片免疫組化，Elisa，WB，免疫熒光、流式細(xì)胞術(shù)等實(shí)驗(yàn)。

組蛋白去乙?；?抗體操作方法：
1.將帶有Flag標(biāo)簽的HDAC1表達(dá)質(zhì)粒分別轉(zhuǎn)染食管癌細(xì)胞EC109和結(jié)腸癌細(xì)胞HCT116，采用免疫印跡檢測(cè)外源基因的表達(dá)。
2.然后采用Flag抗體進(jìn)行親和沉淀，收集蛋白樣品進(jìn)行質(zhì)譜測(cè)定。結(jié)果：采用RT－PCR技術(shù)成功地構(gòu)建了含F(xiàn)lag標(biāo)簽的HDAC1。
3.轉(zhuǎn)染后檢測(cè)顯示該表達(dá)質(zhì)?？筛咝П磉_(dá)于EC109和HCT116細(xì)胞中。
4.親和沉淀所獲得的蛋白樣品經(jīng)質(zhì)譜檢測(cè)后，分別從EC109細(xì)胞和HCT116細(xì)胞中篩選出107和17個(gè)可能與HDAC1相互作用的蛋白質(zhì)。
結(jié)論：通過(guò)質(zhì)譜篩選出可能與HDAC1相互作用的蛋白，為進(jìn)一步研究HDAC1基因功能及其在腫瘤中的生物學(xué)意義奠定基礎(chǔ)。

組蛋白去乙?；?抗體修復(fù)方法：
1，沸水浴修復(fù)，將盛有修復(fù)液和玻片的燒杯置于沸水浴環(huán)境，保持外部沸騰狀態(tài)15min，自然冷卻至室溫。
2，微波修復(fù)，將盛有修復(fù)液和玻片的燒杯置于微波爐中，高火5min，停火3min，中火5min，自然冷卻至室溫。
3，高壓修復(fù)，修復(fù)液加入高壓鍋加熱至沸騰，放入玻片，封蓋加壓持續(xù)加熱至噴氣時(shí)開(kāi)始計(jì)時(shí)修復(fù)2min，自然冷卻至室溫。
4，使用胃蛋白酶修復(fù)，將胃蛋白酶修復(fù)液加入到組織上，37℃，消化30min。

標(biāo)簽：組蛋白去乙?；?抗體，組蛋白去乙酰化酶1，組蛋白去乙酰化酶，抗體

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