一抗和二抗的定義、作用與選擇

?一抗和二抗的種屬來源通常是一樣的?。在選擇二抗時(shí)，通常需要根據(jù)一抗的種屬來源來選擇相應(yīng)的二抗。例如，如果一抗是小鼠源的單克隆抗體，那么二抗應(yīng)選擇抗小鼠的二抗（如山羊抗小鼠或兔抗小鼠）。?

一抗和二抗的定義和作用

?一抗（primary antibody）?：是一種免疫球蛋白，能夠特異性結(jié)合特定的蛋白，并將其純化、檢測和定量。一抗可以是多克隆抗體（pAb）或單克隆抗體（mAb），分別由多個(gè)B細(xì)胞克隆產(chǎn)生或由單一B淋巴細(xì)胞分泌產(chǎn)生。

?二抗（secondary antibody）?：直接與靶抗原連接的一抗結(jié)合，通常用于標(biāo)記和檢測一抗。二抗可以是完整抗體或抗體片段，如IgG分子、Fab片段以及F(ab’)2片段。

選擇二抗時(shí)需要考慮的因素

?一抗的種屬來源?：二抗應(yīng)選用與使用的一抗相同的物種來源。例如，如果一抗是小鼠源的單克隆抗體，二抗則選抗小鼠的二抗（如山羊抗小鼠或兔抗小鼠）。

?一抗的類別和亞類?：二抗需與一抗的類別或亞類相匹配。多克隆抗體主要是IgG類免疫球蛋白，因此相應(yīng)的二抗就是抗IgG抗體；單克隆抗體由于存在不同的亞型，選擇二抗時(shí)需要根據(jù)一抗的類型或亞類相匹配。

?實(shí)驗(yàn)類型?：不同的實(shí)驗(yàn)類型可能需要不同類型的二抗。例如，在雙標(biāo)實(shí)驗(yàn)中，如果兩個(gè)一抗分別來自不同的種屬，則二抗應(yīng)選擇來自第三種種屬的抗體，以避免交叉反應(yīng)。